La electroforesis es una técnica de laboratorio realizada con el objetivo de separar moléculas de ADN, ARN o proteínas de acuerdo a su tamaño y carga eléctrica.
Esta técnica permite realizar el diagnóstico de enfermedades, como la anemia falciforme, verificar la expresión de proteínas o identificar microorganismos.
La electroforesis es un procedimiento simple y de bajo costo, siendo utilizada como una técnica de rutina en laboratorios y proyectos de investigación. De acuerdo con la finalidad de la electroforesis, puede ser necesaria la realización de otras pruebas y exámenes para poder llegar a ciertos diagnósticos.
Para qué sirve
La electroforesis sirve para:
- Identificar virus, hongos, bacterias y parásitos, siendo más común esta aplicación en proyectos de investigación;
- Prueba de paternidad;
- Verificar la expresión de proteínas;
- Identificar mutaciones, siendo útil en el diagnóstico de leucemias;
- Analizar los tipos de hemoglobina circulantes, siendo útil en el diagnóstico de anemia falciforme;
- Evaluar la cantidad de proteínas presentes en la sangre:
- Diagnosticar afecciones que afectan a las células plasmáticas, como macroglobulinemia de Waldenström, gammapatía monoclonal de significado incierto (GMSI) y amiloidosis primaria.
La electroforesis de proteínas también se puede utilizar para ayudar a diagnosticar problemas tiroideos, diabetes, enfermedades hepáticas y algunas enfermedades autoinmunes.
De acuerdo con la finalidad de la electroforesis, puede ser necesaria la realización de otros análisis complementarios, como un hemograma, pruebas de la función renal y hepática, radiografía, entre otros, para que el médico pueda concluir el diagnóstico.
Cómo se realiza este examen
Para realizar la electroforesis se debe:
- Preparar un gel de agarosa o poliacrilamida, según el objetivo de realización de la técnica, así como una tener una solución tampón, cuba de electroforesis, marcador de peso molecular y una sustancia capaz de permitir la visualización de las muestras cuando se exponen a la luz UV o LED;
- Colocar cada muestra en una cavidad del gel, mezclando una pequeña cantidad de marcador de peso molecular;
- Colocar en una de las cavidades un control positivo, que es la sustancia que se sabe qué es, y en otra cavidad el control negativo para garantizar la validez de la reacción. En ambas cavidades también debe haber un marcador de peso molecular;
- Colocar el gel en la cuba de electroforesis, si aún no está, con la solución tampón específica, y encender el dispositivo para que se produzca una corriente eléctrica capaz de generar una diferencia de potencial y separar las partículas según su carga y tamaño. El tiempo de ejecución electroforética varía según el objetivo del procedimiento y puede durar hasta 1 hora;
- Visualizar el resultado de la electroforesis utilizando el transiluminador. Cuando el gel se coloca bajo luz UV o LED es posible visualizar el patrón de bandas, cuanto más grande es la molécula, menor es su migración, acercándose a la cavidad, mientras que cuanto más ligera es la molécula, mayor es el potencial migratorio.
Para validar la reacción se deben visualizar las bandas del control positivo y en el control negativo no se debe ver nada, de lo contrario esto indica que ha habido contaminación y se debe repetir todo el procedimiento.
Tipos de electroforesis
La electroforesis para identificar microorganismos es más usual que sea realizada en laboratorios de investigación, no obstante, para fines diagnósticos, la electroforesis puede ser utilizada para identificar enfermedades hematológicas y enfermedades que evolucionen con el aumento de la cantidad de proteínas, siendo los principales tipos de electroforesis:
1. Electroforesis de hemoglobina
La electroforesis de hemoglobina es una técnica de laboratorio realizada para identificar los diferentes tipos de hemoglobina circulantes en la sangre, siendo posible identificar la presencia de enfermedades relacionadas a la síntesis de hemoglobina. El tipo de hemoglobina es identificado por medio de la electroforesis en pH específico, idealmente entre 8.0 y 9.0, siendo determinado un patrón de bandas que puede ser comparado con el patrón normal, permitiendo así identificar la presencia de hemoglobinas anormales.
Para qué es realizada: la electroforesis de hemoglobina es realizada con la finalidad de investigar y diagnosticar enfermedades relacionadas con la síntesis de hemoglobina, como anemia falciforme y enfermedad de la hemoglobina C, además de ser útil en la diferenciación de las talasemias. Vea cómo interpretar la electroforesis de hemoglobina.
2. Electroforesis de proteínas
La electroforesis de proteínas es un examen solicitado por el médico para evaluar la cantidad de proteínas circulantes en la sangre con la finalidad de identificar ciertas enfermedades. Este examen es realizado a partir de una muestra de sangre, la cual es centrifugada para obtener el plasma, que es la parte de la sangre constituida, entre otras sustancias, por proteínas.
Luego de la electroforesis puede visualizarse un patrón de bandas y, posteriormente, un gráfico donde se indica la cantidad de cada fracción de proteínas, siendo fundamental para el diagnóstico.
Para qué es realizada: la electroforesis de proteínas permite que el médico diagnostique ciertas condiciones, como el mieloma múltiple, deshidratación, cirrosis, inflamaciones, enfermedades del hígado, pancreatitis, lupus e hipertensión, de acuerdo con el patrón de bandas y el gráfico presentado en el informe del examen. Conozca cómo se realiza y cómo interpretar el resultado de la electroforesis de proteínas.